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发酵行业常见的消毒灭菌方法

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发酵是生物实验重要的工具。它是微生物自身生产或直接利用微生物进行有氧厌氧生物活性代谢的过程。生物发酵罐广泛应用于生物制药、细胞类发酵、乳制品、饮料生物工程、制药、精细化工等行业进行发酵处理。

在发酵工业中经常需要对某些物品或产品以及使用和生产这些物品或产品所需的原辅料、包装材料、设备、工器具、生产设施与环境进行必要的消毒和灭菌,甚至包括操作人员同样需要采取必要的消毒与灭菌措施,以确保经消毒与灭菌后的物品或产品符合规定的质量标准。

发酵罐的应用涉及到其细菌的复杂控制,控制其他细菌在发酵过程的影响。如果发酵过程污染细菌,会严重影响发酵过程,导致发酵过程的产量下降,更严重的可能会导致整个发酵过程的失败,发酵产品不能满足的需求,整个发酵过程的失败。因此我们要注意采取灭菌操作。由于工业操作的特点,发酵罐灭菌传统普遍采用湿热灭菌法。

发酵行业常见灭菌方法有:

一、火焰灭菌法:直接在火焰上灼烧灭菌,该方法简单有效,但局限性很大。

二、干热灭菌法:干热灭菌主要运用微生物细胞在高温条件下发生氧化,微生物体内蛋白质变性和电解质浓缩引起中毒等作用而导致微生物死亡。干热灭菌所需的温度较高,时间较长,一般-℃,1-1.5h。实际应用时,对一些要求保持干燥的实验器具和材料可以采用干热灭菌法。

三、湿热灭菌法:湿热灭菌通常利用饱和蒸汽进行灭菌。其原理是借助于蒸汽释放的热能使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键,特别是氢键受到破坏,引起不可逆的变性,使微生物死亡。由于蒸汽有很强的穿透能力,湿热蒸汽存在潜热。蒸汽来源方便,价格低廉,灭菌效果可靠,是目前最为常用的灭菌方法。一般的湿热灭菌条件为℃,30min。然而巴氏消毒法通产是加热到62℃,经过30分钟,以杀死不耐高温的物质中的微生物和病原体的消毒法。牛奶、啤酒、黄酒、酱油和醋等用此法消毒。

四、辐射灭菌法:辐射灭菌是利用高能量的电磁辐射和微粒辐射来杀死微生物,以紫外线最常用。紫外线对芽孢和营养细胞都能起作用,但细菌芽孢和霉菌孢子对紫外线的抵抗力强。紫外线的穿透力低,且距照射物不超过1.2m;对固体物料灭菌不彻底,也不能用于液体物料的灭菌。.

五、化学药品灭菌法:化学药品灭菌法指运用某些化学药品与微生物发生反应而导致微生物蛋白变性、酶失活以及细胞通透性改变而死亡。化学药剂适于生产车间环境的灭菌,接种操作前小型器具的灭菌等,不适用于培养基。化学药品的灭菌使用方法,根据灭菌对象的不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态熏蒸等。常用化学药品有高锰酸钾溶液、漂白粉、乙醇、新洁尔灭和杜灭芬、甲醛、戊二醛、过氧乙酸、焦碳酸二乙酯、酚类等。

六、臭氧灭菌:臭氧灭菌主要是利用臭氧氧化分解微生物内部氧化葡萄糖所需要的酶,并破坏细胞膜,杀死细菌。在GMP验证过程中我们大力推荐臭氧灭菌方法。臭氧灭菌有许多特点:臭氧为气体,能迅速弥漫到整个灭菌空间,灭菌无死角,浓度分布均匀;臭氧灭菌为溶菌级方法,杀菌彻底,杀菌能力与过氧乙酸相当,高于其它消毒剂;臭氧广谱杀菌,可杀灭细菌繁殖体和芽孢、病毒、真菌等,并可破坏肉毒杆菌毒素,另外,臭氧对霉菌也有极强的杀灭作用。

七、过滤除菌:过滤除菌指用适当的过滤材料对液体或气体进行过滤除去微生物。此法主要用于热敏性物质的灭菌和发酵用无菌空气的制备。

发酵罐CIP清洗消毒技术是与热杀菌相对的杀菌方式,其无需对物料进行加热,利用复合型过氧化氢消毒液本身优越的芽孢杀灭能力(代表品牌:诺福Nococide,Kerlide等)在乳制品生产的过程中,进行芽孢的杀灭和预防。因此,评定冷杀菌技术是否有效的核心,可以理解为:

乳制品发酵罐CIP清洗消毒所用到的消毒液的优劣:普通的过氧化氢和含氯类消毒液,无法有效地杀灭芽孢。而诺福采用独有的复合型过氧化氢配方,将传统的过氧化氢能力提升了几十到倍,可以高效杀灭芽孢。




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